蛋白质组学是研究生物体内所有蛋白质表达、功能及相互作用的重要技术,在疾病研究和药物开发等领域得到了广泛应用。但是,对于刚接触这一领域的伙伴来说,可能会感到有些困惑。别担心,今天我们将深入探讨两种常见的蛋白质检测技术——质谱技术和Olink蛋白质组技术,帮助你理清思路。
质谱技术
1. 质谱检测的原理
质谱(MS)是一种分析化学技术,通过测定气相离子的质荷比和丰度来识别样品中的化学成分。质谱仪的核心功能是将化合物电离,生成带电分子或分子碎片,并测量其质荷比。在蛋白质分析中,提取的蛋白质会被变性和消化成肽段,然后离子化,接着通过质谱进行分析。
2. 质谱检测的蛋白质组学流程
整体流程包括样本准备、离子化和质谱分析,确保对蛋白质的全面识别和量化。
3. 常见的数据采集模式
在质谱检测中,主要有两种数据采集模式:DDA(数据依赖型采集模式)和DIA(数据非依赖型采集模式)。DDA是最基本的模式,它选择信号最强的肽段进行分析,数据质量高但可能错过一些信息。与此不同,DIA可以无遗漏地获取样本中所有离子的碎片信息,适合处理大样本量和复杂体系,数据覆盖率更全面。
基于抗体的Olink蛋白质组技术
1. Olink技术概述
Olink采用邻近延伸分析(PEA)技术,使用双抗体探针进行检测。当抗体结合目标蛋白时,DNA链互补延伸形成模板,并通过qPCR或NGS扩增检测信号,实现超灵敏的靶向检测。
2. Olink靶向蛋白分析流程
Olink靶向蛋白分析的主要步骤包括蛋白样本制备、免疫连接、序列延伸、文库制备、上机检测(qPCR或NGS测序)等,最终获得NPX原始数据并进行质控,分析蛋白表达和差异蛋白。
两种技术的比较
不同的蛋白质组学技术各具优势,研究者可以根据研究目的、样品类型以及对检测通量和灵敏度的要求,灵活选择合适的分析方法,以获取准确而可靠的蛋白质组学数据。如果你对蛋白质组学技术感兴趣,或者想了解更多关于尊龙凯时的产品与服务,欢迎随时联系我们!