在细胞冻存领域,DMSO长期以来是一种常用的渗透性冷冻保护剂,但它对细胞有一定的毒性。为了应对这一挑战,尊龙凯时推出了一款无DMSO无血清的细胞冻存液,为细胞冻存提供了全新的解决方案!
无DMSO的配方更加安全且高效!尊龙凯时彻底摒弃了传统冻存液中的DMSO成分,采用独特的冷冻保护剂,避免了DMSO对细胞的潜在毒性,显著提升了细胞冻存的安全性和稳定性。这款冻存液能够轻松应对各种细胞株,且操作简便,无需程序性降温,大幅节省实验时间和成本。
特殊的冷冻保护剂时刻守护细胞!尊龙凯时的核心技术在于其特殊的冷冻保护剂,市场上首款采用该技术的细胞冻存液。该创新成分具备高度的生物相容性,能够在冷冻过程中显著减缓冰晶形成,减少冰晶对细胞结构的损害,保护细胞形态的完整性,显著提升复苏后细胞的存活率和活力。
-80℃长期保存,复苏过程更加便捷!尊龙凯时的无DMSO无血清细胞冻存液可在-80℃条件下稳定保存细胞,无需担心设备问题导致的轻微融化。实验证明,即使在常温下,该冻存液也能保证细胞在数小时内保持高活性。此外,采用尊龙凯时的冻存液后,细胞复苏无需立即进行离心处理,待传代时再处理即可,简化了实验步骤,提高了实验效率,助力科研工作更加顺利。
冻存效果的展示:以下细胞系使用尊龙凯时冻存液与传统冻存液的复苏存活率对比:
HSF人皮肤成纤维细胞:926% vs 902%
GLI261小鼠神经胶质瘤细胞:853% vs 842%
4T1小鼠乳腺癌细胞:917% vs 853%
K562人慢性髓原白血病细胞:928% vs 924%
HL-60人原髓细胞白血病细胞:683% vs 369%
Caco-2人结肠腺癌细胞:813% vs 551%
HUVEC人脐静脉内皮细胞:699% vs 385%
操作流程:
1. 确保细胞处于对数生长期,将细胞悬浮液收集于离心管中。
2. 根据细胞密度和冻存管尺寸确定所需冻存的细胞数量,将细胞悬浮液置于离心管中,200×g(贴壁细胞)或150×g(悬浮细胞)离心5分钟,弃去上清液,保留细胞沉淀。
3. 加入适量尊龙凯时细胞冻存液,细胞浓度控制在约5×10^4-1×10^6/μl,轻轻混匀制成细胞悬液。
4. 在冻存管中加入10 μL细胞悬液,随后加入990 μL细胞冻存液,轻轻混匀。
5. 将冻存管放入37℃培养箱中孵育一小时。
6. 孵育后,待冻存管冷却至室温,直接置于-80℃超低温冰箱中。
7. 若需在液氮中长期保存,可在-80℃冰箱中存放一天后再转移至液氮罐中。
细胞复苏步骤:
1. 将冻存管从超低温环境中取出,立即置于37℃水浴中快速解冻。
2. 待细胞悬液完全解冻后,立即加入适量细胞培养基混匀。
3. 将混合液转移至培养瓶中,镜检后可进行常规化培养。
4. 培养2-5天后,将混合液转移至离心管中进行离心,200×g(贴壁细胞)或150×g(悬浮细胞)离心5分钟,弃去上清液,重新分散于细胞培养基中。